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快速研究測(cè)試出病毒
黃病毒有70多種,其中許多引起人類(lèi)和動(dòng)物疾病,包括登革熱,寨卡病毒和黃熱病病毒。Mariana Sequetin Cunha和合作伙伴Adolfo Lutz研究所的合作者已經(jīng)在巴西驗(yàn)證了一種既快速又靈敏的新型黃病毒鑒定測(cè)試,該實(shí)驗(yàn)室是向圣保羅州政府報(bào)告的領(lǐng)-先流行病學(xué)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室。
有關(guān)該主題的文章已在病毒學(xué)檔案中發(fā)表。
該研究由圣保羅研究基金會(huì)(FAPESP)通過(guò)一個(gè)主題項(xiàng)目提供支持,該項(xiàng)目的主要研究人員(PI)是MaurícioLacerda Nogueira,而常規(guī)研究補(bǔ)助金則是Paulo Cesar Maiorka。
關(guān)鍵問(wèn)題是RT-qPCR是否足夠靈敏以檢測(cè)所分析樣品中的少量病毒。塞奎汀回憶說(shuō),阿道夫·盧茨研究所保留了大量的深度冷凍小鼠,這些小鼠是在1990年代接種的,并儲(chǔ)存在-80°C下。她說(shuō):“我從他們的大腦中提取了遺傳物質(zhì),并尋求通過(guò)制備越來(lái)越稀的溶液來(lái)檢測(cè)不同黃病毒的閾值。”
已證明所建立的協(xié)議是高度敏感和特定的。它可用于檢測(cè)在巴西發(fā)生的不同黃病毒,并用于前哨動(dòng)物和載體中的病毒監(jiān)測(cè)。
Sequetin告訴我們:“我們著手通過(guò)一種可靠的方法來(lái)改善對(duì)巴西黃病毒的監(jiān)測(cè)。為此,我們使用了RT-qPCR分析技術(shù)。”RT-qPCR代表逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)室技術(shù)利用聚合酶鏈反應(yīng)將RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA并擴(kuò)增特定DNA靶標(biāo)。它被認(rèn)為是快速鑒定病毒的黃金標(biāo)準(zhǔn),并且被世界衛(wèi)生組織用于診斷SARS-CoV-2感染。
塞奎汀說(shuō):“直到近,巴西鑒定黃病毒的主要方法還是需要用從人類(lèi)患者或動(dòng)物身上提取的可疑物質(zhì)接種新生小鼠的大腦。”“當(dāng)我于2012年加入阿道夫·魯茲研究所(Adolfo Lutz Institute)擔(dān)任研究員時(shí),我決定建立一種替代方法,該方法不需要老鼠,但可以將患者的血液,血清或內(nèi)臟樣品直接提交RT-qPCR。”